色譜圖其實(shí)簡(jiǎn)單地講是一個(gè)橫坐標(biāo)是時(shí)間縱坐標(biāo)是電信號(hào)的二維圖譜。    

高效液相色譜法，你可以簡(jiǎn)單地想象，固定相是一個(gè)多空海綿狀的柱形結(jié)構(gòu)，樣品在孔洞中進(jìn)進(jìn)出出。因?yàn)楦鱾€(gè)物質(zhì)的吸附能力不同，所以才會(huì)在色譜圖中拉開(kāi)距離。
 

實(shí)驗(yàn)相關(guān)的參數(shù)：

1、保留時(shí)間：也就是可以定性的數(shù)據(jù)參數(shù)

如果使用同樣的色譜柱，同樣的流動(dòng)相，分析同樣的樣品，那么這個(gè)樣品的保留時(shí)間，應(yīng)該是固定的。不同保留時(shí)間的色譜峰，應(yīng)該表現(xiàn)出的是不同的物質(zhì)。如果你跑的是反相色譜，那么色譜峰越靠后，它對(duì)應(yīng)物質(zhì)的極性也就越小。

2、峰面積：也就是可以定量的數(shù)據(jù)參數(shù)

一旦分離，這些成分就被轉(zhuǎn)換成電離狀態(tài)。MS使用質(zhì)荷比作為鑒別組分的特征因子，因此下一步涉及在此基礎(chǔ)上分離組分。質(zhì)荷比對(duì)特定分子比HPLC中的保留時(shí)間更特異，這就是為什么使用MS。質(zhì)量電荷差異分析儀，就像HPLC中的分離技術(shù)一樣，可以有所不同，包括四極桿、飛行時(shí)間和離子阱等分析儀。然后由檢測(cè)器對(duì)出現(xiàn)的離子進(jìn)行計(jì)數(shù)。產(chǎn)生的MS光譜顯示了質(zhì)荷比與峰值強(qiáng)度的關(guān)系。

色譜圖顯示組分作為保留時(shí)間和質(zhì)荷比與質(zhì)量相對(duì)豐度的函數(shù)，這意味著全LC-MS的總輸出是一個(gè)具有兩個(gè)水平軸的圖表。圖表的焦點(diǎn)可以根據(jù)研究人員的目標(biāo)而改變。

峰值檢測(cè)在濾波之后進(jìn)行，其中峰值表示成分或成分的斷裂。峰可以根據(jù)它們覆蓋的高度或面積來(lái)選擇。通過(guò)將存在的峰與已知的峰進(jìn)行匹配，可以通過(guò)眼睛識(shí)別某些峰模式。這可以幫助確定存在什么分子，或者分子中存在多少原子。

在色譜圖中可以讀出來(lái)的參數(shù)，在同一個(gè)色譜條件下，同一個(gè)物質(zhì)的濃度和峰面積是成正比的。也就是說(shuō)，如果你配制1.0mg/ml的X物質(zhì)，進(jìn)樣后峰面積是10000，那么，你配制0.5mg/ml的X物質(zhì)，進(jìn)樣后峰面積差不多就是5000

3、波長(zhǎng):這個(gè)是可以順利進(jìn)行試驗(yàn)的前提條件

同一樣品，同一方法，同一色譜柱，在不同波長(zhǎng)的峰面積是不同的。一個(gè)物質(zhì)指在某些特殊波長(zhǎng)下有吸收。比如一個(gè)物質(zhì)在210nm和254nm處有吸收。那么波長(zhǎng)在280nm處可能無(wú)法檢出該物質(zhì)。所以一個(gè)實(shí)驗(yàn)方法開(kāi)始時(shí)要進(jìn)行波長(zhǎng)掃描。

頻譜濾波旨在去除數(shù)據(jù)中的噪聲，從而便于檢測(cè)感興趣的峰值。在LC - MS過(guò)程中，除了其他方法之外，還可以通過(guò)使用具有較小粒徑的較短柱來(lái)優(yōu)化降噪。

分析物的色譜圖不變，因此它通?？捎米鞣肿宇愋偷闹讣y。

這通常通過(guò)觀察保留時(shí)間和質(zhì)荷比的峰值在哪里來(lái)實(shí)現(xiàn)。目前，色譜圖的大多數(shù)分析都是通過(guò)計(jì)算完成的。這意味著軟件會(huì)將生成的色譜圖與已知的色譜圖進(jìn)行比較，以識(shí)別成分，或者將其存儲(chǔ)為新發(fā)現(xiàn)的色譜圖。