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在發(fā)展中求生存,不斷完善,以良好信譽(yù)和科學(xué)的管理促進(jìn)企業(yè)迅速發(fā)展首頁(yè)-譜標(biāo)服務(wù)-二手AB SCIEX液質(zhì)聯(lián)用測(cè)定糖類的方法
傳統(tǒng)檢測(cè)單糖、雙糖的分析方法有化學(xué)法、光譜法、GCMS、HPLC等方法。其中化學(xué)法無(wú)法準(zhǔn)確測(cè)定單種糖的含量;光譜法的工作繁瑣、誤差比較大;GC-MS方法需要進(jìn)行衍生化反應(yīng),前處理復(fù)雜,不利于快速分析;HPLC法雖然相比其他方法靈敏度好、檢測(cè)速度快、適用范圍廣,但也存在檢出限較低、抗干 擾能力差,尤其對(duì)于食品中低濃度的單糖、雙糖很難進(jìn)行精確的測(cè)定,無(wú)法滿足現(xiàn)階段對(duì)食品檢測(cè)快速、靈敏、準(zhǔn)確的要求。LCMS/MS技術(shù)通過(guò)質(zhì)譜的高選擇性和高靈敏度能夠降低目標(biāo)物的檢出限、提高檢測(cè)的重現(xiàn)性。
由于糖類為水溶性化合物,在常規(guī)的C18色譜柱上沒有保留, 而采用其他填料的親水色譜柱也很難得到太好的峰形或分離度。 因此,選取一款合適的分析糖的色譜柱是液質(zhì)分析糖的實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵點(diǎn)。目前專門測(cè)試糖的糖柱通常為液相柱,需要用到100%純水相來(lái)作為流動(dòng)相,并且流速通常高于1 mL/min,這樣的色譜條件對(duì)于大多數(shù)的質(zhì)譜離子源來(lái)說(shuō)都無(wú)法實(shí)現(xiàn)化合物的有效離子化, 或者只有通過(guò)分流才能實(shí)現(xiàn),但是分流后將損失儀器的檢測(cè)靈敏度,失去了使用液質(zhì)聯(lián)用儀測(cè)試糖的提高靈敏度的目的。
二手AB SCIEX 的 LC-MS/MS液質(zhì)聯(lián)用系統(tǒng)的一大特點(diǎn)就是強(qiáng)大的TurboV離子源技術(shù),離子源的加熱能夠達(dá)到750℃,ESI源耐受流速 范圍 5 μL/min~3.0 mL/min,APCI源耐受流速范圍50 μL/ min~3.0 mL/ min,因此可以直接使用HPLC糖柱在SCIEX液質(zhì)聯(lián)用儀上進(jìn)行測(cè)試, 即實(shí)現(xiàn)了好的分離效果,又提高了檢測(cè)靈敏度。
實(shí)驗(yàn)使用二手
液質(zhì)聯(lián)用
SCIEX 質(zhì)譜系統(tǒng)同時(shí)測(cè)定梨中的葡萄糖、果糖、蔗糖 和山梨醇四種糖, 實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)單、靈敏度高、選擇性好。
實(shí)驗(yàn)思路: 1. 配制果糖、葡萄糖、蔗糖和山梨醇標(biāo)準(zhǔn)曲線,測(cè)試四種水溶性 糖的低檢出限;
2. 測(cè)試碭山酥梨果實(shí)中四種水溶性糖的含量,了解梨中四種糖的比例關(guān)系。
樣品處理 : 1.移取果糖、葡萄糖、蔗糖和山梨醇標(biāo)準(zhǔn)品,用純水稀釋,配制 成 50 ng/mL、100 ng/mL、500 ng/mL、1 μg/mL、5 μg/mL 和 10 μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2.梨果實(shí)中可溶性糖的提取。
梨果實(shí)中糖的提取
材料:碭山酥梨(采集于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江浦園藝實(shí)驗(yàn)站) 將樣品去皮削成小塊,液氮速凍后儲(chǔ)存于-80冰箱。稱取2g樣品,加液氮研磨后,加入80%乙醇7 mL混勻。在37℃水浴中恒溫 30 min,超聲提取15 min,10000 r/min離心15 min。將上清液移 入25 mL容量瓶。重復(fù)提取3次,然后加入80%乙醇定容至25 mL。取2 mL溶液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),用1 mL水溶解蒸干后的固體,溶解時(shí)用超 聲波處理,盡量溶解完全。溶液離心后,用0.22 μm水系濾膜處 理,即可用于測(cè)定。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)此前處理過(guò)程提取出的糖樣品在液質(zhì)儀器上 的響應(yīng)信號(hào)過(guò)高,后樣品又用純水稀釋10倍和1000倍分別上機(jī)測(cè)試。
色譜方法色譜柱:Hi-Plex Ca, 300×7.7 mm; 流動(dòng)相:100%純水洗脫 流速:1 mL/min; 柱溫:85℃; 進(jìn)樣量:10 μL。
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