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二手液質(zhì)聯(lián)用API LC-MS/MS檢測硝基呋喃類代謝物的九個步驟

發(fā)布時間:2019-08-13       點(diǎn)擊次數(shù):10808

二手液質(zhì)聯(lián)用API LC-MS/MS 串聯(lián)質(zhì)譜及液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)結(jié)合了色譜、質(zhì)譜兩者的優(yōu)點(diǎn),將色譜的高分離性能和質(zhì)譜的高鑒別特點(diǎn)相結(jié)合,組成了較完美的現(xiàn)代分析技術(shù),近年來在生物醫(yī)學(xué)、藥學(xué)、環(huán)境檢測、毒物分析等領(lǐng)域發(fā)揮了巨大作用。且隨著現(xiàn)代化高新技術(shù)的不斷發(fā)展及二手液質(zhì)聯(lián)用API LC-MS/MS液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)自身的優(yōu)點(diǎn),液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)必將在未來幾年不斷發(fā)展且在藥物分析中發(fā)揮越來越重要的作用。
                        

                              

二手液質(zhì)聯(lián)用API LC-MS/MS 檢測硝基呋喃類代謝物的九個步驟如下

第一步:配制衍生化后的硝基呋喃代謝物標(biāo)準(zhǔn)溶液,乙腈/水體系,濃度10PPM 
確認(rèn)儀器已經(jīng)校準(zhǔn),氣體、電壓工作正常。 
測試條件: 
離子化方式: ESI+ 
進(jìn)樣5ul/min, Q1 SCAN 觀察M/Z 335,236,249,209及同位素內(nèi)標(biāo)峰,通過調(diào)節(jié)DP,使這幾個峰最強(qiáng)。 
注意:(1)如買來的是已經(jīng)衍生化的標(biāo)準(zhǔn)品,則可四種混配。 
          (2)如是用戶由硝基呋喃代謝物衍生化的,最好四種分別配制,要求Q1 SCAN能明顯觀察到上述離子。

第二步:以第一步測得值為母離子,做PRODUCT ION SCAN(MS2),調(diào)節(jié)CE等參數(shù),使母,子離子都具有一定強(qiáng)度,平滑后得到MS2譜,從各母離子中各選擇2個最高的子離子,分別為 :
呋喃它酮AMOZ: M/Z 291,262; 
呋喃唑酮AOZ: M/Z 134,104; 
呋喃妥因AHD: M/Z 134,104或178; 
呋喃西林SEM: M/Z 192,166,準(zhǔn)確到0.1。 
注意:母離子要采用Q1SCAN測得值,子離子采用PRODUCT ION SCAN測得值。
第三步:以第二步選定的離子對,例如335.1/262.2 等,做MRM SCAN ,TIMS值各為50-200ms,強(qiáng)的離子對短些,弱的可長些。 
第四步:通過軟件操作優(yōu)化各種參數(shù),如溫度、氣流等。

第五步 :在TUNE欄內(nèi)點(diǎn)擊QUANTITATIVEOPTIMIZATION定量優(yōu)化,只需優(yōu)化 SOURCE/GAS項(xiàng)參數(shù)。
第六步 :接好色譜柱,編輯LC梯度洗脫,進(jìn)樣,觀察色譜峰形及保留時間是否合適,否則調(diào)節(jié)流動相,優(yōu)化色譜條件。 
第七步 :用空白提取液配制同樣濃度標(biāo)樣,按上一步方法進(jìn)樣,觀察色譜峰形及保留時間是否合適,峰高有無變化,有無離子抑制現(xiàn)象,否則調(diào)節(jié)流動相,優(yōu)化色譜條件。 
第八步 :用空白提取液配制一系列不同濃度硝基呋喃代謝物標(biāo)樣,按上一步方法進(jìn)樣,例如,分別稀釋為濃度0.25ug/kg, 0.5ug/kg, 1.0ug/kg, 2.0ug/kg, 4.0ug/kg, 8.0ug/kg, 等等。
第九步:按上述方法采集數(shù)據(jù),做標(biāo)準(zhǔn)曲線,并進(jìn)行硝基呋喃代謝物樣品的測定。如果4種同位素內(nèi)標(biāo)齊全,則定量時一一對應(yīng)計(jì)算,如只有AOZ-D4和AMOZ-D5,則1種內(nèi)標(biāo)可對應(yīng)2種硝基呋喃代謝物。

570319569

TEL:400-800-3875

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