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二手液相色譜儀之檢測系統(tǒng)?

發(fā)布時間:2019-08-14       點擊次數(shù):10378

檢測系統(tǒng):二手高效液相色譜的檢測器很多,最常用的有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器等。 

1,紫外檢測器
紫外檢測器是二手液相色譜中應(yīng)用最廣泛的檢測器,適用有紫外吸收物質(zhì)的檢測。在進(jìn)行高效液相色譜分析的樣品中,約有80%的樣品可以使用這種檢測器。

紫外檢測器的工作原理如下:由光源產(chǎn)生波長連續(xù)可調(diào)的紫外光或可見光,經(jīng)過透鏡和遮光板變成兩束平行光,無樣品通過時,參比池和樣品池通過的光強(qiáng)度相等,光電管輸出相同,無信號產(chǎn)生;有樣品通過時,由于樣品對光的吸收,參比池和樣品池通過的光強(qiáng)度不相等,有信號產(chǎn)生。根據(jù)朗伯—比爾定律,樣品濃度越大,產(chǎn)生的信號越大, 這種檢測器靈敏度高,檢測下限約為 10(-10) g/ml,而且線性范圍廣,對溫度和流速不敏感,適于進(jìn)行梯度洗脫。           

                              

2,示差折光檢測器
示差折光檢測器是根據(jù)不同物質(zhì)具有不同折射率來進(jìn)行組分檢測的。凡是具有與流動相折射率不同的組分,二手液相色譜均可以使用這種檢測器。如果流動相選擇適當(dāng),可以檢測所有的樣品組分。

示差折光檢測器分為反射式和沂射式兩種。反射式示差折光檢測器是根據(jù)下述原理制成的:光在兩種不同物質(zhì)界面的反射百分率與入射角和兩種物質(zhì)的折射率成正比。如果入射角固定,光線反射百分率僅與這兩種物質(zhì)的沂射率成正比。光通過僅有流動相的參比池時,由于流動相組成不變,故其折射率是固定的;光通過工作池時,由于存在待測組分而使折射串改變,從而引起光強(qiáng)度的變化,測量光強(qiáng)度的變化,即可測出該組分濃度的變化。偏轉(zhuǎn)式示差折光檢測器是根據(jù)下述原理:當(dāng)一束光透過折射率不同的兩種物質(zhì)時,此光束會發(fā)生一定程度的偏轉(zhuǎn),其偏轉(zhuǎn)程度正比于兩物質(zhì)折射率之差。

示差折光檢測器的優(yōu)點是通用性強(qiáng),操作簡便;缺點是靈敏度低,最小檢出限約為 10(-7)g/ml ,不能做痕量分析。此外,由于洗脫液組成的變化會使折射率變化很大,因此,這種檢測器也不適用于梯度洗脫。

3,熒光檢測器
物質(zhì)的分子或原子經(jīng)光照射后,有些電子被激發(fā)至較高的能級,這些電子從高能級 躍至低能級時,物質(zhì)會發(fā)出比入射光波長較 長的光,這種光稱為熒光。在其他條件一定的情況下,熒光強(qiáng)度與物質(zhì)的濃度成正比。許多有機(jī)化合物具有天然熒光活性,另外,有些化合物可以利用柱后反應(yīng)法或柱前反應(yīng)法加入熒光化試劑,使其轉(zhuǎn)化為具有熒光活性的衍生物。在紫外光激發(fā)下,熒光活性物質(zhì)產(chǎn)生熒光,由光電倍增管轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘枴?/span>

熒光檢測器是一種選擇性檢測器,它適合于二手液相色譜測定稠環(huán)芳烴、氨基酸、胺類、維生素、蛋 白質(zhì)等熒光物質(zhì)。這種檢測器靈敏度非常高,其檢出限可達(dá)10(-12)_10 (-13)g/ml,比紫外檢測器高2—3個數(shù)量級,適合于痕量分析 。而且可以用于梯度洗脫。其缺點是適用范圍有一定的局限性。

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